COMENTARIO SOBRE EL ARTÍCULO DE HUBNER Y COLS.

El Grupo de Perth

23 de Abril de 2009

El 27 de Marzo de 2009 Hubner y cols. publicaron un artículo en Science1 donde se afirmaba que “Con el uso de un clon del VIH infeccioso y fluorescente, rastreamos el movimiento de la Gag en las células T CD4 vivas y captamos  la translocación directa del VIH a través de la sinapsis virológica”.

Por “clon del VIH infeccioso y fluorescente” los autores quieren decir un trozo de ADN del que se afirma que codifica proteínas consideradas el “VIH”, incluso una a la que se la conoce como “Gag” (antígeno específico de grupo). El adjetivo “fluorescente” se refiere a la inserción dentro de la región Gag de un ADN extraño, uno que codifica una proteína que da una luz verde fluorescente cuando se la expone a la luz azul. Los experimentos comprendían una manipulación de esta combinación de ADN “viral” y no viral a los que los autores denominan “este virus”. Ellos afirmaron que “Este virus revela con exactitud la localización de la Gag, lo que permite que se puedan rastrear las células infectadas y las partículas virales con una alta sensibilidad (12)”. La referencia 12 es otro artículo2 del mismo grupo donde utilizan la misma técnica.

El artículo de Hubner no proporciona ninguna información sobre los métodos de laboratorio empleados para “infectar” las células o para demostrar la existencia del ADN donde introdujeron el ADN del GFP en el genoma de una partícula de retrovirus única. Todo lo que sus datos muestran es el movimiento de la proteína verde o dentro la célula o su transferencia de una célula, supuestamente “infectada” por “este virus”, a otra célula. A causa de que para “infectar” ellos emplearon la “iGFP-Gag del VIH”, supusieron, solo que sin ninguna prueba que (a) la adición de varios cientos de nucleótidos al “ADN del VIH” no tuvo efecto en la transcripción, translación y procesamiento/empaquetado de las proteínas del “VIH”; (b) la proteína Gag del VIH está sujeta a la proteína de color verde fluorescente y se mueve conjuntamente con ella. Sobre todo, en ningún lugar de este artículo ni en su referencia 12, existe ninguna evidencia acerca de la existencia de partículas virales. Todo lo que tienen es una acumulación de proteína de color verde en algunas gemaciones en la superficie de la célula y la transferencia a otra célula. Estas gemaciones aparecen en cualquier célula, especialmente en las células malignas como las células de Jurkat empleadas en los experimentos*. Estas gemaciones son el resultado de la polimerización de la actina y la contracción del sistema de la actina/miosina, es decir, son proteínas presentes en todas las células.3-5

Es significativo el hecho de que los autores informaron que la “Transferencia viral mediada por la sinapsis es inhibida potencialmente por los inhibidores de la actina como la citochalasin D”. También cabe notar que no existen grupos de control en este experimento. Si los autores hubieran utilizado grupos de control adecuados y los experimentos hubiesen sido hechos a ciegas, sus conclusiones habrían podido ser completamente diferentes. Según nuestro punto de vista, la siguiente afirmación de AIDSTruth: “En lo que seguramente es un golpe grave a los renegados del Sida, algunos investigadores publicaron micrografías al microscopio en video del VIH cuando se transfería entre las células T”, no es respaldada por ninguna evidencia.

*http://en.wikipedia.org/wiki/Jurkat_cells

Observen lo siguiente:

La proteína Gag de color verde fluorescente (GFP) ha sido empleada en otros experimentos con el “VIH”. Más abajo señalamos dos preguntas que hicimos al Dr. Sandord Simon, del Laboratorio de biofísica celular de la Universidad Rockefeller, Nueva York, quien fue el coautor de dicho artículo6 publicado en Nature en 2008. El Dr. Simon no nos respondió.

1 Vuestros datos muestran puntos fluorescentes diferenciados de la proteina gag/GFP empaquetados estrechamente y de otras proteínas “que aparentemente se localizan en la membrana plasmática” y en el espacio extracelular. Sin embargo vosotros afirman tener evidencia de la existencia de partículas semejantes a los virus, viriones, viriones en gemación y tal como el titulo lo demuestra “... biogénesis de viriones VIH-1 individuales en células vivas”. ¿En qué se basa vuestra afirmación? [Es decir, dado que los virus son partículas submicroscópicas, sin pruebas que utilicen la micrografía al microscopio electrónico es imposible afirmar de que se encuentran “partículas semejantes a los virus, viriones, viriones en gemación” o “... biogénesis de viriones del VIH-1 individuales en células vivas”].

2 Vosotros habéis utilizado las células HeLa, que son una línea celular maligna. Las células malignas presentan gemación aun cuando no están infectadas por ningún virus.7 Ya en 1974 Hans Gelderblom informo la existencia de VLPs en las células HeLa.8 Suponiendo de que vosotros teníais datos que demuestran la existencia de VLPs, gemaciones, partículas libres, viriones, como podéis interpretar vuestras imágenes como que representan el VIH y no fenómenos celulares tomando en cuenta el hecho de que vosotros no informasteis la existencia de grupos de control? [VLPs = partículas semejantes a los virus].

Referencias

1. Hubner W, McNerney GP, Chen P, Dale BM, Gordon RE, Chuang FY, et al. Quantitative 3D video microscopy of HIV transfer across T cell virological synapses. Science 2009;323:1743-7. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?cmd=Retrieve&db=PubMed&dopt=Citation&list_uids=19325119

2. Chen P, Hubner W, Spinelli MA, Chen BK. Predominant mode of human immunodeficiency virus transfer between T cells is mediated by sustained Env-dependent neutralization-resistant virological synapses. J Virol 2007;81:12582-95. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?cmd=Retrieve&db=PubMed&dopt=Citation&list_uids=17728240

3. Jackobson K, O'Dell D, Holifield B, Murphy TL, August JT. Redistribution of a major cell surface glycoprotein during cell movement. J Cell Biol 1984;99:1613-1623.

4. Carpen O, Pallai P, Staunton DE, Springer TA. Association of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) with actin-containing cytoskeleton and a -actinin. J Cell Biol 1992;118:1223-1234.

5. Herman IM, Crisona NJ, Pollard TD. Relation between cell activity and the distribution of cytoplasmic actin and myosin. J Cell Biol 1981;90:84-91.

6. Jouvenet N, Bieniasz PD, Simon SM. Imaging the biogenesis of individual HIV-1 virions in live cells. Nature 2008;454:236-40. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?cmd=Retrieve&db=PubMed&dopt=Citation&list_uids=18500329

7. Papadopulos-Eleopulos E, Page BA, Causer D, Turner VF, Papadimitriou JM. Cancer and epigenetic reversion--the fundamental role of redox. Am J Pathol 2007;171:1726-7; author reply 1727. http://theperthgroup.com/EPE/AMJLetterNov07.pdf

8. Gelderblom H, Bauer H, Ogura H, Wigand R, Fischer AB. Detection of oncornavirus-like particles in HeLa cells. I. Fine structure and comparative morphological classification. Internat J Cancer 1974;13:246-53. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?cmd=Retrieve&db=PubMed&dopt=Citation&list_uids=4817575